Левиты (в узком смысле слова) должны были, обыкновенно, помогать священникам в служении при храме (Чис 3:6, Чис 18:2); в пустыне их служение заключалось в заботах о скинии и ее принадлежностях, которые они переносили. Три левитских рода, сыны Гирсоновы, Каафовы и Мерарины переносили скинию (Чис 1:51, Чис 4:1). В храме они должны были сторожить у дверей, смотреть за одеждой, сосудами, светильниками, печь хлебы предложения, носить дрова и воду, славословить Господа музыкой и пением, приготовлять животных для жертв, принимать жертвования от народа и т.д. (см. 1Пар 9:18, 1Пар 9:23, 2Пар 29:1, 2Пар 30:16, 2Пар 35:1, Неем 13:22, Пс 133:1); кроме того, они должны были «учить весь Израиль» (2Пар 35:3, Срав. 2Пар 30:22, Неем 8:7) и поэтому они жили в разных местах, служа связью между всеми коленами и внедряя в них набожность и страх Божий. Они изучали закон и под наблюдением священников выступали среди народа, как учителя и судьи (2Пар 17:19, 2Пар 19:8 и дал.). Для содержания их была назначена 10-ая часть хлеба, плодов и скота; но из этой же десятины они сами уплачивали десятину священникам; вследствие того, что левиты не владели землей, эта десятина считалась тем «начатком», который народу следовало давать Господу (Чис 18:21 и дал.). Давать десятину левитам не было повелено, но было предоставлено свободной воле всякого из народа; поэтому и встречаются различные напоминания (Втор 12:12, Втор 12:18). Для житья левиты получили 48 городов с принадлежащими к ним полями, пастбищами и садами; из них 13 были даны священникам. Все эти города были расположены около Иерусалима, во владениях прилежащих колен. Шесть из этих левитских городов были назначены убежищем для ненамеренных убийц (Чис 35:1, Нав 20:9). Во время своего служения в храме левиты получали содержание из запасов, находящихся при храме, а также пользовались частью от ежедневных жертв (Втор 12:18). Этим же пользовались добровольно служащие левиты, которые, горя ревностью, постоянно находились при святилище (Втор 18:6). Посвящение левитов с омовением, бритьем, с приношением жертвы очищения и т.д. описывается в Чис 8:5 и далее.
Подобно священникам, левиты делились на очереди или чреды (1Пар 23:1 — 1Пар 26:1). Время их служения продолжалось в возрасте от 25 до 50 лет (Чис 4:3, Чис 4:23, Чис 8:24 и дал.). По прошествии этих лет им поручалось более легкое служение. Давид позволил им начинать свое служение с 20 лет (1Пар 23:24); также и Езекия (2Пар 31:17). В 1Пар 23:4;1Пар 5 указаны следующие левитские должности: руководящие делами в доме Господнем — 24 000; наблюдатели (евр. текст) и судьи — 6 000; привратники 4 000; певцы и музыканты 4 000. Различные чреды сменяли друг друга через неделю (2Пар 23:4, 2Пар 23:8, 2Пар 31:17). После падения Израильского царства, когда Иеровоам назначил жрецов для служения перед поставленными им тельцами и козлами, левиты, жившие в Израильском царстве, переселились во владения колена Иудина и Вениаминова (2Пар 11:13, 2Пар 13:9 и дал.). После Вавилонского плена многие из них возвратились в Иудею (Неем 11:15, Неем 12:1). По Иосифу Флавию, все левиты были освобождены от военной службы; после плена, во время персидского владычества, они были освобождены от всякого рода податей (Езд 7:24). В Новом Завете о них говорится редко (Лк 10:32, Ин 1:19, Деян 4:36).